巴西蘑菇是一种草地腐生菌，对养分的要求与蘑菇（特指双孢蘑菇，下同）相似，栽培巴西蘑菇所使用的培养料和栽培蘑菇的培养料制作的程序基本相同。培养料主要是由畜、禽类便与农作物秸秆配合堆制而成的发酵粪草培养料。

（1）原料配方与用量按米2栽培面积计算，需准备稻草千克，牛粪0千克，尿素10千克，石膏15千克，石灰15千克。

培养料中粪和草的比例为（6~4）：（4~6）（千重），牛粪资源丰富的地方，可在配方中按高限添加，相反，若牛粪资源缺乏，可减少牛粪用量，相对增加尿素用量。一般投料量为25~35千克／米2的干料。

（2）培养料堆制场所、预处理、堆制类型用于栽培巴西蘑菇的培养料应事先适当堆制发酵，以便借助料堆中微生物群的活动降解培养料，使之更有利于菌丝的吸收利用。同时，微生物群代谢过程中产生的生物热，能使堆温上升，并杀死堆料中的部分病原菌和害虫，为巴西蘑菇生长创造一个良好的生长环境。